Noções básicas de culturas de liofilização (liofilização)
A liofilização, também conhecida como liofilização, é um processo usado para preservar material biológico através da remoção da água da amostra, que envolve primeiro congelar a amostra e depois secá-la, sob vácuo, a temperaturas muito baixas. As amostras liofilizadas podem ser armazenadas por muito mais tempo do que as amostras não tratadas.
Por que a liofilização é usada
A liofilização, ou liofilização de culturas bacterianas , estabiliza as culturas para armazenamento a longo prazo, minimizando os danos que podem ser causados pela secagem rigorosa da amostra.
Muitos microrganismos sobrevivem bem quando liofilizados e podem ser facilmente reidratados e cultivados em meios de cultura, após períodos prolongados de armazenamento.
A liofilização também é usada nas indústrias de biotecnologia e biomedicina para preservar vacinas, amostras de sangue, proteínas purificadas e outros materiais biológicos.
Este procedimento de laboratório curto pode ser usado com qualquer liofilizador comercialmente disponível para preservar sua coleção de cultura.
O processo de liofilização
O processo de liofilização é, na verdade, uma aplicação de um fenômeno físico chamado sublimação: a transição de uma substância do estado sólido para o gasoso, sem passar primeiro pela fase líquida. Durante a liofilização, a água na amostra congelada é removida como vapor de água, sem primeiro descongelar a amostra.
Erros comuns
Um dos erros mais comuns quando se trata de liofilização é não conhecer o ponto de fusão da sua amostra, o que dificulta a escolha do liofilizador correto.
Suas amostras podem derreter durante o processo. Outro erro comum é pensar que o frio é melhor quando liofilizado em um liofilizador do tipo prateleira. Durante a secagem primária, você deve definir a temperatura da prateleira para logo abaixo da temperatura eutética da amostra. Deve haver apenas calor suficiente para estimular as moléculas da amostra a se moverem, mas evitar o derretimento.
Um terceiro erro é usar o equipamento errado para suas amostras. Como os liofilizadores são usados em um ambiente de grupo, você deve saber o seguinte antes de comprar um:
- Quanta umidade será liofilizada
- O que é a amostra (e a temperatura eutética)
- Como usar corretamente o liofilizador
Se a unidade não for usada corretamente, pode arruinar todas as amostras. O que nos leva a outro erro comum: Não manter a bomba de vácuo. A bomba deve estar em excelente estado de funcionamento para que a liofilização funcione. O funcionamento da bomba com o balastro de gás aberto 30 minutos antes e depois do processo de secagem a frio aumentará a vida útil da bomba. Abrir o reator de gás expurga os contaminantes da bomba para evitar danos aos componentes internos. Você deve verificar o óleo da bomba com freqüência quanto a descoloração e partículas, e trocar o óleo conforme necessário. Mudanças regulares de óleo mantêm a bomba puxando no vácuo ideal durante o processo de congelamento a seco.
Por fim, ter os acessórios de liofilização errados para o seu processo de liofilização também pode ser um grande erro. Você precisa de uma amostra de rolha sob seu vácuo? Então uma câmara de parada é necessária. Você está liofilizando em frascos? Em seguida, certifique-se de ter uma câmara de secagem com portas.
Evitando os erros acima, você pode fornecer um cuidado melhor para o seu liofilizador e bomba e ter amostras melhores quando a liofilização estiver concluída.
Referências
Notícias Labconco. "Top 5 erros cometidos no processo de liofilização." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes